作者: 組培設備 發布時間: 瀏覽次數0
胡楊(Populus euphratica)因具有很強的抗風沙、抗沙埋、抗鹽堿、抗寒、抗澇、排堿等作用而成為干旱地區防風固沙、植樹造林的主要樹種,主要分布在新疆、內蒙古、青海、甘肅和寧夏5個省(區)境內,對西北的生態環境建設有重要影響。其繁殖方式分為有性(種子)繁殖和無性(營養)繁殖,種子繁殖的苗木分化嚴重、生長參差不齊,胡楊種子在落種后生活力迅速降低,6~40 d后約95%會喪失活力;無性繁殖可保持母株的優良性狀,主要為用胡楊根條、枝條進行扦插繁殖和組培繁殖,但硬枝扦插生根力極弱,繁殖困難,因而研究組培快繁技術十分必要。筆者從瓜州縣國家級胡楊良種基地選優母樹上采集一年生飽滿枝條開展組培快繁試驗,現將試驗結果總結如下。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
從瓜州縣國家級胡楊良種基地選優母樹上采集一年生飽滿枝條,經過催芽處理,使腋芽萌發,待腋芽長至3~5 cm時剪下,作為備用的外植體材料。
1.2 試驗方法
1.2.1 消毒時間篩選。取長1.5 cm且帶1個腋芽的嫩枝條作為外植體,將外植體浸泡在無菌水中30 min,使其充分吸收無菌水,之后轉入超凈工作臺下,先用無菌水沖洗2次,然后用 75%酒精分別對外植體處理 10、15、20、25、30 s,用無菌水沖洗干凈后,再用0.1%升汞處理分別處理3、4、5、6 min,無菌水沖洗5次,用滅過菌的濾紙吸干外植體材料表面的水分,備用。
1.2.2 培養基篩選。本試驗初步設計5種芽誘導培養基,分別為 MS、MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L、MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。在超凈工作臺下,將消毒過的嫩枝條剪成長0.5~1.0 cm的莖段,每個莖段帶1個腋芽,接種在芽誘導培養基上進行培養。
2 結果與分析
2.1 75%酒精處理時間篩選
由表1可知,用75%酒精處理10 s和15 s的結果較理想,死亡率為15%~20%,二者的差異不明顯;處理20、25、30 s后的莖段,腋芽逐漸變黑,后期莖段也隨之變黑死亡,死亡率達到60%~95%。
表1 75%酒精不同處理時間對胡楊莖段的影響
2.2 0.1%升汞處理時間篩選
用0.1%升汞處理3 min的結果較理想;處理4、5、6 min的外植體生長較差,初期與處理3 min的差異不明顯,但隨著時間的延長,處理6 min的材料最先出現死亡現象,且葉片開始脫落,之后處理4、5 min的材料也相繼出現類似的現象。這可能是因為消毒劑處理時間過長,對培養材料造成的損傷比較嚴重。
表2 0.1%升汞不同處理時間對胡楊莖段的影響
2.3 培養基篩選
將長0.5~1.0 cm帶腋芽的莖段接種于5種不同配方的芽誘導培養基上后,經過30 d左右的觀察,結果如表3所示。其中,在4號培養基上接種效果較好,啟動數達到14;在5號培養基上接種效果次之,啟動數為11;其他3種培養基配方效果較差。因此,在下次的試驗中,可在4號培養基配方的基礎上,適當調整激素濃度。
表3 不同芽誘導培養基篩選結果
3 結論
試驗結果表明,胡楊外植體用75%酒精處理時間以10 s和15 s較好,二者的差異不明顯;0.1%升汞處理3 min的處理結果較好;將長0.5~1.0 cm帶腋芽的莖段接種在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培養基上效果較好。后期可在芽誘導培養基篩選試驗的基礎上,適當調整細胞分裂素和生長素的比例和濃度,以便誘導出更多的芽。
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