1、瀕危藥用植物組織培養研究概況

　　由于生態環境的不斷惡化和人類對藥用植物的大量運用，許多的藥用植物受到嚴重的破壞，有很多已經瀕臨滅絕.中國科學院植物研究所2013年版的《中國植物紅皮書》第一卷中，共收載了388種國產珍稀瀕危野生植物.其中我國瀕危藥用植物有46種.

　　藥用植物種類較多，所涉及的科目廣，在草本、木本、藤本植物中都普遍存在，瀕危藥用植物體細胞中含有較多的生物活性成分，很多藥用活性成分易導致植物材料褐化，組織培養難度較大.經過長期的組織培養研究，目前瀕危藥用植物的組織培養已取得一定成就，在百合科、五加科、石竹科、杜仲科、木蘭科、蝶形花科等科屬中已有部分瀕危藥用植物實現組織培養快速繁殖.

　　2、影響瀕危藥用植物組織培養的主要因子

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　　外植體類型是瀕危藥用植物組織培養的重要影響因子之一.用金鐵鎖幼嫩莖段作為外植體進行組織培養.金鐵鎖幼嫩莖段經過不定芽誘導、不定芽增殖和不定根誘導建立了簡便、安全、高效的金鐵鎖不定根培養體系.比較了不同外植體不定芽分化能力.生長良好的種子萌發無菌苗，切取上胚軸、下胚軸、葉柄、葉脈為外植體，上胚軸為最適外植體，不定芽分化率為96%，玻璃化和褐化程度都較低.

　　用黃精葉鉤吻的葉片、葉柄、莖、花瓣和花柄為外植體，研究不同外植體對愈傷組織誘導的影響.黃精葉鉤吻的五種外植體都能夠誘導出愈傷組織，莖誘導愈傷組織數量最多，也是愈傷組織誘導率最高的，在兩端切口處形成綠色大塊的愈傷組織.用鐵鎖幼莖和葉片為外植體進行組織培養.組培過程中切口處愈傷組織開始膨脹，然后乳白色愈傷組織生長，最后愈傷組織逐漸覆蓋住切口.以帶芽莖段為材料誘導愈傷組織分化.帶芽莖段在其節上休眠芽萌發后，基部可產生質地緊密、再分化能力極強的愈傷組織.

　　研究了肉蓯蓉的組織培養.外植體選擇肉蓯蓉肉質莖的維管組織，選擇該處外植體是愈傷組織誘導時間最短、分化的數量最多、誘導率最高、組織狀態最好.研究了荷葉鐵線蕨的組織培養與快速繁殖.以荷葉鐵線蕨成熟孢子為外植體.經過一系列消毒后，將孢子接種在孢子萌發培養基上.孢子能夠很好的萌發生長出原葉體，并且原葉體簇生成團.

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　　培養基為植物提供吸收所需要的各種物質，不同藥用植物所需要營養成分不盡相同，因此選擇適合培養基是非常重要的.對影響平貝母愈傷組織生長諸因素研究.研究發現MS培養基最適合平貝母愈傷組織培養，其次是B5培養基.White、LS和N6培養基是最不適合平貝母愈傷組織培養的培養基.

　　對比了MS培養基和B5培養基對蓖子三尖杉的愈傷誘導的影響.發現MS培養基接種一段時間后葉的表面有不均勻的顆粒愈傷長出.用B5培養基的嫩葉，顏色變成深綠色，沒有愈傷生成，該結果表明B5培養基不適宜蓖子三尖杉的愈傷誘導.研究不同培養基對瀕危藥用植物地楓皮的組織培養.在篩選6種培養基的過程中不同培養基中芽的長勢、芽數均有很大區別.MS培養基中的芽壯，數量多，但VW培養基中的芽細，數量很少.不同培養基中芽的長勢從壯到弱順序為:MS>ER>B5>N6>N68>VW.研究了不同培養基對降香黃檀外植體誘導和繼代增殖的影響.在外植體誘導過程中用改良DCR(增加KNO3460mg/L)誘導愈傷組織最好，繼代培養過程中用MS1能生長正常，無褐化或極少數褐化，增殖率也最高.

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　　外源激素的種類、濃度和比例是植物組織培養中最重要的因素之一.保持激素比例適中時，則會繼續保持原有結構的愈傷組織形態.研究不同濃度的6-BA和NAA的配比對半楓荷外植體誘導和誘導叢生芽的影響.NAA濃度的增加外植體愈傷組織誘導率會隨之增加.叢生芽的增殖系數會隨著6-BA濃度增加而提高，但是隨著6-BA濃度增加生長出來的叢生芽易破碎，有效芽幾乎不能分離出來.對藥用植物金鐵鎖進行組織培養研究.研究中發現2，4-D對于愈傷組織誘導和生長要比6-BA和IAA顯著.6-BA和IAA對愈傷組織誘導和生長有一定影響效果，適宜濃度6-BA和IAA的配比可以明顯促進金鐵鎖愈傷組織的增值.研究了荷葉鐵線蕨的組織培養與快速繁殖.荷葉鐵線蕨在含有2，4-D培養基上愈傷組織為塊狀、顆粒狀，白色，在含有KT的培養基上愈傷組織為顆粒狀，黃綠色，在同時添加了KT和NAA培養基中愈傷組織的誘導效果最佳.探討了不同激素對人參組織培養的影響.2，4-D對愈傷組織誘導影響最大，而BA對不定芽的生長影響最大，激素的濃度不同對組織培養過程中的影響程度也不相同.因此激素對瀕危藥用植物組織培養有至關重要的作用.

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　　光照、溫度、pH等環境因素能明顯的影響瀕危植物組培效果.對比了光暗培養對蓖子三尖杉愈傷組織的影響.光照培養愈傷組織誘導率要高于暗培養條件，而在暗培養條件下愈傷組織的發生時間較光照培養要早.光照培養的愈傷組織顏色鮮綠，愈傷組織膨脹水潤，而暗培養愈傷組織顏色暗黃，僅有較小愈傷顆粒，外植體干皺.張紅梅[61]對藥用植物翅果油樹進行組織培養研究.暗培養對愈傷組織誘導過程中可以明顯提高誘導速率，但是誘導出愈傷組織質量低，并且也極易褐化.光培養對愈傷組織誘導較慢，但是誘導出來的愈傷組織質量高，且不易褐化.所以暗培養對愈傷組織脫分化有明顯提高，而光培養則是在愈傷組織繼續生長有顯著效果.

　　展望

　　藥用植物組織培養是對傳統藥用植物繁殖方法的突破，為藥用植物無性繁殖拓展了一個新的天地，可以使有性繁殖低或不能有性繁殖的藥用植物在組培過程中繁育出新的植株，并且不受時間限制和空間約束.可以為藥用植物規?；蜆藴驶a提供資源種苗，防止品種退化且優化品種.可以保存瀕危藥用植物種質資源，防止物種滅絕、保護生物多樣性.

　　目前不少藥用植物中都建立了相應的組織快繁體系，但對于藥用植物組織培養過程中不同的培養因素對植物有效藥用成分的影響研究的不多，今后在藥用植物組織培養中要在培養階段就緊密的和藥用價值相結合，根據其藥用價值的高效性來建立植物的組織培養快速繁殖體系.使用組織培養、多倍體誘導等技術快速繁殖優良種質藥用植物;瀕危藥用植物有效成分通過植物生物反應器生產，或通過生物轉化、酶促反應生產藥物是藥用植物組織培養的發展方向.

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