中華枸杞組培快繁技術研究

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　　枸杞(Lycium chinense)，落葉小灌木，茄科，枸杞屬，17世紀中葉被引種到法國，其后在歐洲、地中海沿岸國家及美洲國家相繼栽培和發展。枸杞為名貴的中藥材，又是良好的滋補品。近年來，枸杞又發展成為保健飲料和食品的加工原料，需求量日益增加。中華枸杞分布在我國東北、河北、山西、陜西等地區。中華枸杞用種子繁殖，其后代分離嚴重，選出的優良植株，靠分蘗繁殖很慢，用常規扦插方法，存在繁殖材料來源有限，成活率低等問題。本試驗以遼寧省農業科學院引進的中華枸杞的嫩芽作為外植體，采用組培的方法擴繁，具有用材少，繁殖系數高，速度快等優點。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料選擇

　　材料于2015年7月采于遼寧省農業科學院院內，選生長旺盛、健康的中華枸杞植株，采當年生的嫩枝作為外植體。

　　1.2 外植體處理

　　選用優良單株當年生嫩枝，剪去葉片，只留有嫩芽，用洗衣粉水洗去表面污垢，用流水沖洗30 min左右。將嫩枝剪成2 cm左右帶1個芽的小段，放入75%乙醇溶液中浸泡5～10 s，用無菌水沖洗，用濾紙吸干，再放入0.1%的氯化汞溶液中消毒，芽消毒時間設計3、5、7 min，用無菌水沖洗3～4次，將帶芽的莖段兩端與氯化汞接觸處各切掉0.5 cm，接種到誘導培養上。

　　1.3 培養基選擇

　　1.3.1 誘導培養基選擇

　　以Ms為基本培養基，分別添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg/L和 IAA 0.1、0.5、1.0 mg/L濃度的激素，共計9個組合，pH值調為5.8，添加3% 濃度的綿白糖。將處理好的外植體接種到以上培養基中，每瓶接種一個芽。

　　1.3.2 增殖培養基

　　以Ms為基本培養基，分別添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg/L和 IAA 0.5、1.0、2.0 mg/L濃度的激素，共計9個組合，pH值調為5.8，添加3% 濃度的綿白糖。將誘導出的愈傷組織切成0.5 cm見方的小塊，接種到增殖培養基中，每瓶接種1塊。

　　1.3.3 生根培養基

　　以1/2 Ms為基本培養基，分別添加 NAA0、0.1、0.5、1.0 mg/L，共計 4個組合，添加 2%濃度的綿白糖。待不定芽長到2 cm左右時切下接種到生根培養基中，每瓶接種4個芽，接種20瓶，14 d后統計生根情況。

　　1.3.4 生根苗移栽

　　待瓶苗生有2～3條以上根時即可進行移栽，移栽基質分別設定草炭、草炭∶河沙1∶1、草炭∶蛭石1∶1、河沙四種組合，14 d后觀察成活率。

　　2 結果與分析

　　2.1 外植體滅菌時間選擇

　　如表1所示，枸杞芽的最佳滅菌時間是5 min，時間過短芽表面的菌不能完全殺死，時間過長由于芽的組織比較嫩，氯化汞會把芽的生長點破壞掉，使芽不能萌發，也不能產生愈傷組織。

　　表1 外植體滅菌時間的選擇

　　2.2 誘導培養基的選擇

　　將滅完菌的芽接種到6-BA與IAA的9個組合中(見表2)，每個組合中均有愈傷組織長出，但數量和質地有很大差別，高濃度的6-BA的組合中長出的愈傷組織大都產生了玻璃化的現象，只有少量的芽長出，6-BA 0.5與IAA 0.1的組合長出的愈傷組織呈綠色，質地緊密有多量的芽長出，由此可見，這配比組合有利于枸杞的愈傷組織的誘導。

　　2.3 芽增殖培養基的選擇

　　將帶有芽的愈傷組織切成帶芽小塊，每瓶接種1塊愈傷組織，每個組合接種40瓶，芽數隨機，15 d后統計增殖芽數。高濃度的6-BA與低濃度的IAA組合有利于芽的增殖，高濃度的IAA與低濃度的6-BA組合有利于芽的生長，在生產中應選擇既有利于芽分化又有利于生長的激素，以6-BA 0.5+IAA 2.0的組合效果最佳。

　　2.4 生根培養基的選擇

　　將超過2 cm的芽切下接種到生根培養基中，以1/2 MS為基本培養基，不添加任何激素均能生根，但生根率較低，添加NAA 0.1～0.5效果最好，生根率可達98%。

　　2.5 栽培基質的選擇

　　選擇生有2～3條根，生長健壯的苗進行移栽，移栽前2 d把瓶蓋打開煉苗，移栽時將苗根部的瓊脂清洗干凈，防止滋生霉菌導致根系腐爛。由圖1可以看出，草炭∶河沙=1∶1的基質適合枸杞組培苗的生長，移栽后苗注意遮蔭，待14 d左右苗完全成活后，撤掉遮蔭。

　　表2 不同6-BA、NAA對芽誘導的影響